Лысов А.В.
Журнал "Свиноводство"; 09-10. 2024 г.
А.В. ЛЫСОВ, ведущий ветеринарный врач-консультант ГК ВИК
Пролиферативная энтеропатия (ПЭ), или илеит. Об этом заболевании знает любой практикующий ветеринарный врач на свиноводческих объектах. Ущерб от него, наносимый экономике предприятия, очень недооценен рядом специалистов. Данные исследований зарубежных коллег представлены в таблице.
Научные данные показывают, что илеит является заболеванием, которое влечет за собой потери валового привеса поголовья, снижение выхода мяса на одну свиноматку, увеличение затрат на кормление и ветеринарное обслуживание. Что же такое илеит в целом?
Пролиферативная энтеропатия вызывается Lawsonia intracellularis – анаэробной облигатной внутриклеточной бактерией, которая поражает тонкий кишечник, а иногда и толстый кишечник свиней и других животных, включая хомяков и лошадей. Инфекция характеризуется пролиферацией, кровотечением, некрозом или любой комбинацией, обычно называемой илеитом, влияющей на здоровье и производственную эффективность выращиваемых свиней. Несмотря на десятилетия исследований этого патогена, факторы патогенеза и вирулентности данного организма точно не известны.
Согласно зарубежным исследованиям, профилактика инфекции, вызванной L.intracellularis, достигалась введением в корм субтерапевтических доз антибиотиков – стимуляторов роста. Ранее этот метод считался эффективным в борьбе с L.intracellularis. В настоящее время действует запрет на их использование в странах ЕС и РФ. Таким образом, применение кормовых ингредиентов или добавок с фитобиотиками и пробиотиками для контроля заболевания, провоцируемого L.intracellularis, является многообещающим. Это основывается на современном понимании микробиома кишечника свиней в целом, а также на предварительных данных об экологии заболевания, накопленных за последние 30 лет.
Патогенез
Обычно заболевание проявляется в виде одной из трех клинических форм: острой ПЭ, хронической ПЭ либо инфекция может оставаться субклинической. В наиболее молниеносных (и менее частых) – острая форма ПЭ. L.intracellularis может быть связана с внезапной смертью свиней старше четырех месяцев в результате тяжелого острого кровотечения в кишечный тракт, известного как пролиферативная геморрагическая энтеропатия, или острая ПЭ. В этих случаях у свиней может произойти обескровливание до развития диареи. И единственным клиническим признаком может быть бледность. Однако в более затяжных случаях наблюдается мелена, или гематохезия. Смертность при острой ПЭ составляет 12–50% и более характерна для ремонтных племенных животных.
Хроническая форма ПЭ вызывает негеморрагическую диарею (фекалии серо-зеленого цвета от полутвердых до жидких), потерю веса или снижение темпов прибавки веса у молодых свиней, но клинические признаки часто слабо выражены и диарея может отсутствовать. Заболевшие свиньи имеют возраст 6–16 недель и нередко находятся в состоянии от субъоптимального до плохого с поведением от нормального до угнетенного. Хотя этот подтип широко известен как хроническая ПЭ, его также называют аденоматозом кишечника свиней, пролиферативным илеитом или просто илеитом.
Хроническая ПЭ, как правило, не летальна, и выздоровление в течение нескольких недель является нормой. Уровень смертности составляет примерно 2%, и падеж обычно является результатом вторичных инфекций. Однако выделение с калом L.intracellularis увеличивает вероятность передачи вируса от свиньи к свинье, отрицательно влияя на заболеваемость, конверсию корма, стоимость лечения и время убоя.
Субклиническая инфекция характеризуется снижением темпов роста и увеличением конверсии корма при отсутствии других клинических признаков. Хотя субклинически инфицированные свиньи обычно не страдают диареей, они, как правило, имеют гистологические поражения, выделяют бактерию и могут оставаться источником инфекции для других свиней. Исследования, объясняющие дихотомические результаты L.intracellularis (субклиническая инфекция по сравнению с явными клиническими признаками, включая острую или хроническую ПЭ), на сегодняшний день отсутствуют.
Клинические проявления
Макроскопические поражения, связанные с L.intracellularis, могут возникнуть на всех уровнях кишечного тракта. Обычно они локализуются в терминальном отделе подвздошной кишки, откуда могут распространяться дистально на ободочную и слепую кишку или проксимально на дистальный отдел тощей кишки. Слизистая оболочка кишечника может утолщаться за счет приподнятых островков слизистой оболочки (первоначально описанных как полипы) в более тяжелых или запущенных случаях островки сливаются, в результате чего слизистая оболочка становится более плотной, сморщенной или церебриформной (фото 1 А). В некоторых случаях наблюдается очаговый некроз с наложенными на него желтыми или серыми отложениями фибрина и клеточного дебриса (фото 1 Б).
Вторичная инфекция может привести к некротическому энтериту, характеризующемуся коагуляционным некрозом и наложением фибрина. Если свинья выживает, некротическая ткань заменяется грануляционной. Это поражение известно как региональный илеит, или в просторечии – «кишка шланга». Утолщение слизистой оболочки свойственно как для острой, так и для хронической формы ПЭ. Но только при острой ПЭ содержимое кишечника состоит из крови, в том числе из сгустков крови, свободной крови и фибрина, точное происхождение которого остается неясным. Хотя эти поражения наводят на мысль о ПЭ, они не являются единственным признаком ПЭ, вызванным L.intracellularis.
Например, общие черты энтерита ЦВС-2 могут быть очень похожи на некротизирующую форму ПЭ. Свиньи также могут быть инфицированы при отсутствии макроскопически заметных поражений. Или поражения бывают небольшими и очаговыми, поэтому их легко не заметить.
Посмертно диагностика также может быть затруднена, если ПЭ маскируется или осложняется другими заболеваниями, такими как сальмонеллез или дизентерия свиней. Микроскопические поражения ПЭ очень спецефичны и, как правило, патогномоничны, за исключением случаев, когда они легкие, нечастые и осложняются вторичными или сопутствующими инфекциями. Поражения хорошо охарактеризованы и вкратце представляют собой гиперплазию энтероцитов крипт с образованием удлиненных, расширенных и ветвящихся крипт. Гиперплазия сопровождается увеличением митозов и уменьшением или полной потерей бокаловидных клеток. Однако гиперплазия крипт неспецифична и может протекать как неспецифическое заболевание.
На фото 1 А представлена подвздошная кишка свиньи при острой пролиферативной энтеропатии. Просвет заполнен остатками запекшейся крови, обнаженная слизистая оболочка заметно утолщена и сморщена.
На фото 1 Б изображена подвздошная кишка свиньи при острой ПЭ. Сгусток крови был удален, обнажив сильно извитую слизистую оболочку. Тяжелый случай хронической ПЭ выглядит примерно также при отсутствии только внутрипросветного тромба.
На промышленных свинокомплексах из-за интенсивного выращивания и откорма свиней, а также из-за дефицита кадров зачастую игнорируют элементарные правила зоотехнии и дезинфекции. Ситуация, в которой выполнена некачественная мойка, далеко не редкость. В погоне за прибылью многие специалисты повышают процент осеменения, что приводит к увеличению живорожденных поросят и, как следствие, приходится в более сжатые сроки готовить производственные помещения под заселение. От этого страдает не только качество мойки и дезинфекции, но и подготовки со стороны технических служб. Нередко в таком ритме проводятся постановки свинопоголовья в сырые станки. Все вышеописанные факторы отрицательно влияют на здоровье свиней и провоцируют возникновение различных заболеваний, в том числе и илеита.
В любом случае к решению данной проблемы необходимо подходить комплексно. Первое, с чего стоит начать, – диагностика. Ключевой момент – это определить, что мы имеем дело именно с пролиферативной энтеропатией, а не со смежными заболеваниями, имеющими подобные клинические проявления. Важно выявить, с каким штаммами мы столкнулись, – от этого зависит выбор метода борьбы с заболеванием.
Диагностика
Гуморальный иммунный ответ начинается через две недели после контакта свиньи с L.intracellularis. В этом случае антитела, специфичные к L.intracellularis, в сыворотке могут быть выявлены с помощью серологических анализов, таких как иммунопероксидазный монослойный анализ и твердофазный иммуноферментный анализ. Пик иммунного ответа приходится на третью и четвертую недели, а специфические антитела остаются обнаруживаемыми до 13 недель после заражения.
Регулярные мониторинговые серологические исследования каждые три недели могут стать эффективным подходом для оценки циркуляции L.intracellularis в стаде. При интерпретации серологических результатов также следует принимать во внимание другие источники антител помимо гуморального ответа на инфекцию, в том числе антитела материнского происхождения, которые поросенок получает с молозивом. Антитела этого типа сохраняются в возрасте до пяти-шести недель, они также могут присутствовать в ответ на профилактическую вакцинацию. При использовании инактивированной вакцины можно ожидать выявления антител в сыворотке крови. У свиней, которые перорально получают модифицированную живую вакцину, редко появляются титры сывороточных антител после контакта с L.intracellularis.
Улавливание частей ДНК бактерий
Методы амплификации, такие как стандартная ПЦР и (к)ПЦР в реальном времени, предлагают быстрые и чувствительные способы определения ДНК (фракций) L.intracellularis в образцах фекалий, ректальных мазках или образцах кишечника. Выделение может начаться через неделю после заражения. Следовательно, (к)ПЦР обеспечивает менее затратное по времени и точное прижизненное обнаружение L.intracellularis на первых стадиях инфекции. Присутствие бактерий не обязательно указывает на негативное влияние на здоровье свиньи.
При субклинической форме заболевания увеличение количества L.intracellularis в фекалиях продемонстрировало сильную корреляцию со снижением среднесуточного прироста и темпами роста. Другими словами, чем выше бактериальная нагрузка, тем сильнее негативное влияние на здоровье и продуктивность свиней. К сожалению, молекулярные методы не способны дифференцировать патогенные штаммы L.intracellularis от живого аттенуированного вакцинного штамма.
Методика купирования
После получения и интерпретации результатов диагностики можно в полном объеме заняться составлением стратегии борьбы с илеитом в стаде.
Первый этап – это настройка технологического процесса. Передвижение животных между участками должно быть организовано таким образом, чтобы было достаточно дней для мойки и дезинфекции помещений. Сам процесс мойки должен быть выполнен на высоком уровне с использованием специальных средств – не только дезинфицирующих, но и моющих. В случае с предприятиями, положительными по пролиферативной энтеропатии, мойка навозных ванн в том числе имеет большое значение. Если речь идет об участке откорма с бетонными щелевыми полами, то данная процедура довольно трудоемкая, но все же хотя бы раз в год ее необходимо делать. Если же условия идеальные, то мойку ванн требуется выполнять после каждой партии животных, ровно так же, как выполняется мойка станков и станочного оборудования.
Одним из важных моментов является разделение работников по участкам и использование отдельного инвентаря для каждой партии животных. То есть обслуживающий персонал должен быть закреплен за определенной возрастной группой животных. Также будет актуально перед каждой отдельной комнатой расположить дезинфицирующие ванны или коврики для обработки обуви. Проще говоря, чем меньше будет прямой и побочный контакт между разными группами и возрастами животных, тем легче будет протекать заболевание, так как уменьшится фактор перезаражения. Казалось бы, простейшие меры, но они могут снизить проявления заболевания в десятки раз.
При лечении илеита большинство специалистов применяют антибактериальные препараты. К сожалению, не все препараты подходят. Какие-то антибиотики обладают длительным сроком выведения и сразу теряют актуальность, так как илеит в большинстве случаев проявляется на финале откорма. Есть антибиотики, которые недостаточно эффективны, хоть и отличаются минимальным сроком выведения из организма. Помимо этого, в глобальном плане есть проблема с прогрессирующей антибиотикорезистентностью, что еще больше ограничивает выбор продуктов для борьбы с илеитом.
Этим вопросом обеспокоены во всем мире. Для контроля подобной проблемы многие коллеги периодически проводят исследования по определению минимальной ингибирующей концентрации (МИК). Есть доступные опыты с информацией по МИК в отношении L.intracellularis. Испытания производились на бразильских и таиландских штаммах. Для исследования были взяты наиболее часто используемые против данного изолята антибактериальные препараты на основе тиамулина, тилозина, хлортетрациклина и линкомицина.
При внутриклеточном тестировании МИК тиамулина имеет наибольшую активность против бразильских изолятов L.intracellularis, при этом МПК варьировалась от 0,125 до 2 мкг/мл. Тилозин проявлял умеренную активность в отношении изолятов L.intracellularis с МПК от 2 до 8 мкг/мл. Хлортетрациклин имел более низкую активность при МПК от 8 до 64 мкг/мл. Линкомицин проявлял наименьшую активность в отношении изолятов L.intracellularis с МПК более 128 мкг/мл.
В отношении внутриклеточной активности результаты показали, что тиамулин обладал наибольшей активностью против изолятов L.intracellularis с МИК от ≤0,125 до 2 мкг/мл. Хлортетрациклин – умеренной антимикробной активностью к L.intracellularis с МПК от 32 до 64 мкг/ мл. Тилозин имел разные результаты между двумя штаммами: умеренную активность против BRPHE02_E8 (16–32 мкг/мл) и низкую активность против BRPHE01_E5 (>128 мкг/мл). Линкомицин обладал наименьшей антимикробной активностью при МПК >128 мкг/мл для обоих изолятов.
Подобные исследования подчеркивают правильность в выборе наиболее эффективных антибактериальных препаратов.
Лечение
Как правило, для лечения илеита специалисты на свиноводческих предприятиях используют монопрепараты. Из-за несоблюдения дозировок по различным причинам и прочего риск возникновения антибиотикорезистентности вырастает что снижает эффективность лекарственного препарата. Избежать этого возможно двумя способами: первый – применение комбинированных антибиотиков, а второй – введение в лечебную схему обязательной периодичной ротации действующих веществ (ДВ) в антибактериальных препаратах.
Хорошо зарекомендовал себя при илеите ветеринарный препарат Тиациклин®, который имеет более высокую биодоступность и длительный период полувыведения. Комбинация этих антибактериальных ДВ оказывает взаимоусиливающее действие на микроорганизмы за счет подавления синтеза белка в микробной клетке на разных стадиях и влияет на блокировку патогенных бактериальных агентов, вызывающих не только заболевания желудочно-кишечного тракта, но и болезни респираторного тракта.
Тиамулин и доксициклин хорошо всасываются в желудочно-кишечном тракте и проникают во все органы и ткани организма, где создают высокие терапевтические концентрации на протяжении 24 часов, что обуславливает эффективность в отношении фокусного инфекционного агента L.intracellularis. Это связано прежде всего с механизмом действия этих антибактериальных препаратов. Он заключается в связывании тиамулина с 50S рибосомальной субъединицей чувствительных бактерий, что приводит к нарушению синтеза белков в бактериальной клетке. Необходимо отметить, что резистентность бактерий к макролидам, и в частности к тиамулину, развивается крайне медленно. Доксициклин ингибирует синтез протеинов в микробной клетке, нарушая связь транспортной аминоацил-РНК с 30S субъединицей рибосомальной мембраны.
Квалифицированно подобранная концентрация ДВ в препарате Тиациклин®, а также высокая стабильность в растворе данного ветеринарного препарата позволяют использовать его без риска потери действующих веществ в процессе применения.
Для ротации при лечении илеита подойдут монопрепараты тилозинсодержащие либо антибактериальные препараты комбинированные, например те, которые в составе имеют ДВ спектиномицин и линкомицин.
Что касается альтернативных методов помощи в борьбе с илеитом, то сейчас активно набирает обороты использование кормовых добавок с фитобиотиками, в частности с тимолом и карвакролом (из эфирных масел корицы, орегано и тимьяна), которые также обладают антибактериальными свойствами к L.intracellularis. Стоит отметить, что экстракты фитобиотиков разрушают мембраны бактериальной клетки, что также повышает эффективность работы антибактериальных препаратов. Экстракты эфирных масел регулируют оксидативный стресс, положительно влияют на морфологию и микрофлору кишечника, а впоследствии – на иммунную систему. За комплексным лечением стоит большое будущее, особенно учитывая острые вопросы возрастающей антибиотикорезистентности.
Не вызывает сомнений, что в каждом конкретном случае при проявлении пролиферативной энтеропатии у свиней необходимо:
• соблюдать технологию перевода групп животных;
• выполнять правила мойки и дезинфекции помещений;
• периодически проводить микробиологический мониторинг с определением чувствительности бактерий к антибактериальным препаратам.
При лечении илеита в приоритете применение многокомпонентных ветеринарных препаратов, обладающих синергетическим эффектом в комплексе с кормовыми добавками, включающими фитобиотики. Такой подход будет способствовать быстрому и эффективному результату при лечении свиней с диагнозом «илеит».