Сазонова О.А.
РЕЗЮМЕ
Фармакокинетику тиамулина и доксициклина в плазме крови телят исследовали после однократного внутримышечного введения раствора тиациклина для инъекций в рамках доклинических исследований. Раствор тиациклина для инъекций вводили 6 телятам однократно внутримышечно в область шеи в дозе 1 мл / 12,5 кг В 0; 0,5; 1,0; 1,5; 3,0; 6,0; 12,0; 18,0; 24,0. Через 48,0 и 96,0 часов после введения тиациклина были собраны образцы крови, и концентрации тиамулина и доксициклина в плазме крови были проанализированы с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием флуоресцентного детектора. Установлен фармакокинетический профиль тиамулина и доксициклина в плазме крови телят.
Введение
Для лечения ассоциированных инфекций телят целесообразно применять комбинированные лекарственные средства, обладающие максимально широким спектром действия и активные в отношении как первичного этиологического фактора, например, брахиспир или микоплазм, так и в отношении вторичной бактериальной инфекции, например эшерихий, стрептококков, стафилококков, гемофиллюсов. Таким лекарственным средством является комплексный препарат Тиациклин® в форме раствора для инъекций на основе тиамулина (10%) и доксициклина (10%), разработанный специалистами компании ООО «ВИК — здоровье животных». В рамках доклинических исследований препарата проведено изучение фармакокинетики действующих компонентов препарата в плазме крови одного из целевых видов животных — телят, с целью определения основных фармакокинетических параметров препарата. Тиамулин — полусинтетический макролидный антибиотик, относится к группе плевромутилина, детерпенового антибиотика, являющегося продуктом ферментации определенных видов базидиомицетов (Pleurotus mutilis, Clitopilus passeckerianus). Тиамулин представляет собой трициклическое ядро (соединение), состоящее из циклопентанона, циклогексила и циклооктана, и боковой цепи, присоединенной в положении С14 октанового кольца. Тиамулин проявляет высокую активность в отношении микоплазм, которые являются одними из наиболее значимых этиологических факторов в инфекционной патологии телят. Данный препарат также активен в отношении некоторых грамотрицательных микроорганизмов — возбудителей респираторных заболеваний, таких как Actinobacillus spp. и Pasteurella multocida. Тиамулин блокирует соединение первой пептидной цепочки на рибосомальном уровне, образуя физиологически неактивный инициационный комплекс, который препятствует построению пептидной цепи. Проникая в микроорганизм, молекула тиамулина располагается внутри центра пептидилтрансферазы 503-субъединицы рибосомы. В случае смешанных инфекций использование тиамулина в комбинации с другими антибактериальными препаратами позволяет не только расширить спектр действия тиамулина, но и повысить его антибактериальную активность за счет синергидного эффекта. Синергидное действие тиамулина с препаратами группы тетрациклина было подтверждено в наших исследованиях и исследованиях многих авторов [1].
Доксициклин (6-дезокси-5-окситетрациклин) — полусинтетический антибиотик из группы тетрациклинов. Тетрациклин и доксициклин являются структурными изомерами, которые различаются только положением гидроксильной группы. Другое расположение гидроксильной группы в молекуле доксициклина приводит к значительному повышению его липофильных свойств по сравнению с тетрациклином. Доксициклин обладает широким спектром антибактериального действия в отношении многих грамположительных (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Actinomyces spр., Clostridium spp., Bacillus anthracis, Corynebacterium spp., Erysipelothrix spp., Listeria spp.) и грамотрицательных (Haemophilus influenzae, Haemophilus parasuis, Pasterurella multocida, Bordetella spр., Brucella spр., Bartonella spр., Actinobacillus pleuropneumoniae, Сampylobacter spp.) микроорганизмов, а также микоплазм (M. synoviae, M. hyopneoumonia, M. hyorhinis, M. hyosynoviae), спирохет, хламидий и риккетсий [1].
Доксициклин ингибирует синтез протеинов в микробной клетке, нарушая связь транспортной аминоацил-РНК с 30S-субъединицей рибосомальной мембраны. В комбинации тиамулин и доксициклин оказывают взаимоусиливающее действие на микроорганизмы за счет подавления синтеза белка в микробной клетке на разных стадиях.
Цель исследования
Целью настоящего исследования являлось определение фармакокинетических параметров тиамулина и доксициклина в плазме крови телят после парентерального введения препарата тиациклин. Для реализации указанной выше цели было необходимо:
- провести на телятах открытое фармакокинетическое исследование после однократного внутримышечного введения препарата Тиациклин;
- провести математическую статистическую обработку полученных данных с последующим расчетом фармакокинетических параметров исследуемого препарата.
Материалы и методы исследования
Фармакокинетику тиамулина и доксициклина после однократного внутремышечного введения Тиациклина раствора для инъекций изучали на 6 телятах голшти- но-фриской породы массой 100-120 кг, которым испытуемый препарат вводили внутримышечно в область шеи в дозе 1 мл препарата на 10,0 кг живой массы животного. До введения препарата и через 0,5; 1,0; 1,5; 3,0; 6,0; 12,0; 18,0; 24,0; 48,0 и 96,0 часов после введения препарата у животных отбирали пробы крови в индивидуальные промаркированные пробирки с гепарином. Из цельной крови готовили плазму крови для исследования. Был отработан метод анализа действующих веществ препарата (тиамулина и доксициклина) в плазме крови на основе ВЭЖХ с УФ-детектированием. Нижний предел обнаружения для тиамулина составил 0,5 мкг/мл; для доксициклина — 0,125 мкг/мл. Методика основана на раздельном определении тиамулина и доксициклина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии после их совместной экстракции из образцов плазмы органическим растворителем. Количественное определение каждого компонента проводилось методом абсолютной калибровки.
Результаты исследования
Проведена первичная обработка данных в системе координат «концентрация лекарственного вещества в плазме крови — время» после внутримышечного введения и рассчитаны системные фармакокинетические параметры тиамулина и доксициклина методом статистических моментов. При определении процента экстракции действующих веществ из плазмы крови в модельном опыте установлено, что для тиамулина он составил 79,62%, а для доксициклина — 81,05%. Анализ основных фармакокинетических параметров тиамулина и доксициклина в плазме крови телят показал, что действующие вещества препарата относительно быстро всасываются, достигая своего максимума через 1,0 ч. Максимальная концентрация тиамулина в плазме крови животных составила 2,48±1,38 мкг/мл, доксициклина — 0,55±0,07 мкг/мл. Период полувыведения тиамулина из плазмы крови телят составил 1,49±0,95 ч, у доксициклина — 14,99±5,46 ч. Средние значения кажущихся объемов распределения тиамулина (3,77±1,32 л/кг) и доксициклина (34,36±9,30 л/кг) указывают на интенсивное проникновение исследуемых лекарственных веществ в липофильные структуры организма животных. Оба компонента проникают в липофильные структуры организма животных; однако основываясь на среднем значении кажущегося объема распределения ^С) доксициклина (34,36±9,30 л/кг), которое в 9 раз выше М тиамулина (3,77±1,32 л/кг), первый компонент проникает интенсивнее и депонируется в них. Средние значения кажущихся объемов распределения доксициклина (34,36±9,30 л/кг) и тиамулина (3,77±1,32 л/кг) указывают на интенсивное проникновение исследуемых лекарственных веществ в липофильные структуры организма животных.
Заключение
Отработан метод анализа действующих веществ (тиамулина и доксициклина) инъекционного препарата Тиациклин® в плазме крови у подопытных животных на основе ВЭЖХ с УФ-детектированием. Определен ряд основных фармакокинетических параметров тиамулина и доксициклина в плазме крови телят, показавших, что тиамулин и доксициклин быстро и хорошо всасываются, обеспечивая антибактериальные концентрации в организме телят после однократной инъекции до 24 часов.